021-6151 3876/138-1713-9466

服务项目

chanpinzhongxin

联系我们

  • 地址: 上海市徐汇区东安路8号青松城商务楼701室

  • 电话: 021-6151 3876

  • 手机: 189-1400-0129

  • 邮箱: sh_yyjk@163.com

当前位置: 首页  /  服务项目

 什么是PD-1/PD-L1

  程序性细胞死亡分子1(programmed cell death-1,PD-1)是近年来发现的一种负性共刺激分子。程序性细胞死亡配体1(programmed cell death-Ligand 1,PD-L1)是PD-1的配体,PD-1与PD-L1结合后可提供抑制性信号,诱导T细胞凋亡,抑制T细胞的活化和增殖。PD-1和PD-L1广泛表达于多种肿瘤细胞,当受体与配体结合可抑制下游NF-κB的转录并促使干扰素-δ分泌的下调,最终抑制T细胞免疫,导致免疫抑制性肿瘤微环境形成,使肿瘤细胞逃避机体的免疫监控和杀伤。而阻断PD-1/PD-L1信号通路可以逆转肿瘤免疫微环境,恢复T细胞的抗肿瘤活性,从而增强内源性抗肿瘤免疫效应。

 

 PD-1抑制剂治疗肿瘤的效果与生物标记物之间的关联

  在许多肿瘤免疫治疗的早期研究中发现,对于免疫组化(IHC)检测出的PD-L1蛋白高表达的肿瘤组织相比于PD-L1表达呈阴性或是低表达量的肿瘤组织而言,肿瘤对免疫检查点抑制剂(这里是PD-1抑制剂)具有更高的应答率。NCCN肿瘤临床实践指南(NCCN指南(R))推荐,PD-L1检测是转移性非小细胞肺癌(NSCLC)患者治疗过程中诊断评估的重要部分。所有被诊断为鳞状细胞或非鳞状细胞的NSCLC患者都需要检测PD-L1表达[2]。

 

 何时检测?如何检测?

  1、PD-L1蛋白在多种类型的肿瘤细胞上都有表达的免疫调控相关生物标记,其中包括NSCLC。

  2、在鳞状细胞以及非鳞状细胞NSCLC患者的肿瘤中检测其PD-L1表达量可能有助于更好地了解患者的肿瘤,并且有助于确定治疗方案。

  3、PD-L1表达量有助于识别可能获得检查点抑制剂最大获益的患者群体。

  4、在诊断期对患者进行PD-L1表达量检测,同时进行组织学亚型分类检测。

  5、诊断期未进行检测的患者,在使用二线治疗方案或更优治疗方案前进行检测可对决定治疗方案起到参考作用。

 

 用什么样本进行检测?

  1、PD-L1检测的组织样本与其他免疫组化检测的样本制备方法一致。

  2、福尔马林固定,石蜡包埋的样本可用于检测。

  3、组织标本厚度应该在3-4毫米之间,在10%中性福尔马林缓冲液内固定12-72小时,经一系列酒精和二甲苯脱水、透明,然后在不超过60o的熔化石蜡内浸蜡。

  4、将蜡块切割成为4-5微米厚的切片并粘附于防脱玻片上,在2-8oC中避光保存以保存抗原,应在6个月内对切片进行染色。

  5、每例待检标本应至少提供 5 张连续切片:1张用于HE染色,1张用于IHC检测、1张用于试剂阴性对照,其余备用。

 

 检测试剂盒抗体

  基于以上机理,我们提及的PD-L1的检测是基于细胞蛋白水平的检测,因此临床试验中以免疫组化方法为主。也就是大家在手术或穿刺后取得的肿瘤组织进行切片染色,通常在病理报告中显示。免疫组化是检测蛋白表达的经典手法,其通过抗体着色后由病理医师镜下观察根据着色深浅来评价表达情况。因此除了染色技术外,抗体的特异性也尤其重要。目前已经上市并批准用于NSCLC的三种检查点抑制剂有Keytruda(Pembrolizumab)、Opdivo(Nivolumab)、Tecentriq(Atezolizumab),针对这三种药物的PD-L1平台检测抗体分别为Dako的22C3、28-8和Ventana的SP142,其中前两项为FDA批准的试剂盒抗体,后一项为实验室研发的检测方法。

103JAB1-10.gif

 

 Keytruda(Pembrolizumab)——Dako 22C3抗体

  2015年10 月 2 日,美国 FDA 加速批准了默沙东公司(Merck)的Keytruda(pembrolizumab)用于治疗晚期(转移性)非小细胞肺癌(NSCLC),适用于其它药物治疗后疾病进展及肿瘤表达PD-L1蛋白的患者。数据显示,接近九成的PD-L1高表达肺癌患者有肿瘤缩小的情况,为晚期肺癌治疗的新突破,基于该药对EGFR阴性、ALK阴性、应用铂类化疗时和化疗后疾病进展的NSCLC患者的疗效,美国FDA授予其突破性治疗认定(BTD,breakthrough therapy designation)。由于临床需要筛选出肿瘤组织PD–L1高表达的肺癌患者,对其使用PD-L1抑制剂才能最大获益,为此,FDA批准了Keytruda 与一种伴随诊断检测 PD-L1 IHC 22C3 pharmDx 一起使用,后者是全球第一个在非小细胞肺癌中检测PD-L1表达的伴随诊断方法,属于Agilent旗下的Dako公司,采用的是免疫组化IHC方法。Keytruda(R) (Pembrolizumab)治疗NSCLC的效果与PD-L1表达的关系,以PD-L1蛋白在肿瘤细胞中的占比百分数(TPS)为参数,临床试验数据显示[2]。